पीसीआर, या पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन, डीएनए अनुक्रमों को बढ़ाने के लिए उपयोग की जाने वाली एक तकनीक है।इसे पहली बार 1980 के दशक में कैरी मुलिस द्वारा विकसित किया गया था, जिन्हें उनके काम के लिए 1993 में रसायन विज्ञान में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था।पीसीआर ने आणविक जीवविज्ञान में क्रांति ला दी है, जिससे शोधकर्ताओं को छोटे नमूनों से डीएनए को बढ़ाना और इसका विस्तार से अध्ययन करना संभव हो गया है।
पीसीआर एक तीन-चरणीय प्रक्रिया है जो थर्मल साइक्लर में होती है, एक मशीन जो प्रतिक्रिया मिश्रण के तापमान को तेजी से बदल सकती है।तीन चरण हैं विकृतीकरण, एनीलिंग और विस्तार।
पहले चरण में, विकृतीकरण, डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए को दो स्ट्रैंड्स को एक साथ रखने वाले हाइड्रोजन बांड को तोड़ने के लिए उच्च तापमान (आमतौर पर लगभग 95 डिग्री सेल्सियस) तक गर्म किया जाता है।इसके परिणामस्वरूप दो एकल-फंसे डीएनए अणु बनते हैं।
दूसरे चरण में, एनीलिंग, तापमान को लगभग 55 डिग्री सेल्सियस तक कम कर दिया जाता है ताकि प्राइमरों को एकल-फंसे डीएनए पर पूरक अनुक्रमों में शामिल होने की अनुमति मिल सके।प्राइमर डीएनए के छोटे टुकड़े होते हैं जिन्हें लक्ष्य डीएनए पर रुचि के अनुक्रम से मेल खाने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
तीसरे चरण, विस्तार में, टैक पोलीमरेज़ (एक प्रकार का डीएनए पोलीमरेज़) को प्राइमरों से डीएनए के एक नए स्ट्रैंड को संश्लेषित करने की अनुमति देने के लिए तापमान को लगभग 72°C तक बढ़ा दिया जाता है।टाक पोलीमरेज़ एक जीवाणु से प्राप्त होता है जो गर्म झरनों में रहता है और पीसीआर में उपयोग किए जाने वाले उच्च तापमान का सामना करने में सक्षम है।
पीसीआर के एक चक्र के बाद, परिणाम लक्ष्य डीएनए अनुक्रम की दो प्रतियां है।कई चक्रों (आमतौर पर 30-40) के लिए तीन चरणों को दोहराकर, लक्ष्य डीएनए अनुक्रम की प्रतियों की संख्या तेजी से बढ़ाई जा सकती है।इसका मतलब यह है कि आरंभिक डीएनए की एक छोटी मात्रा को भी लाखों या अरबों प्रतियां बनाने के लिए बढ़ाया जा सकता है।
अनुसंधान और निदान में पीसीआर के कई अनुप्रयोग हैं।इसका उपयोग आनुवंशिकी में जीन और उत्परिवर्तन के कार्य का अध्ययन करने के लिए, फोरेंसिक में डीएनए साक्ष्य का विश्लेषण करने के लिए, संक्रामक रोग निदान में रोगजनकों की उपस्थिति का पता लगाने के लिए और प्रसव पूर्व निदान में भ्रूण में आनुवंशिक विकारों की जांच के लिए किया जाता है।
पीसीआर को कई रूपों में उपयोग के लिए भी अनुकूलित किया गया है, जैसे कि मात्रात्मक पीसीआर (क्यूपीसीआर), जो डीएनए की मात्रा को मापने और रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पीसीआर (आरटी-पीसीआर) की अनुमति देता है, जिसका उपयोग आरएनए अनुक्रमों को बढ़ाने के लिए किया जा सकता है।
इसके कई अनुप्रयोगों के बावजूद, पीसीआर की सीमाएँ हैं।इसके लिए लक्ष्य अनुक्रम और उपयुक्त प्राइमरों के डिज़ाइन के ज्ञान की आवश्यकता होती है, और यदि प्रतिक्रिया स्थितियों को सही ढंग से अनुकूलित नहीं किया जाता है तो त्रुटि की संभावना हो सकती है।हालाँकि, सावधानीपूर्वक प्रयोगात्मक डिजाइन और निष्पादन के साथ, पीसीआर आणविक जीव विज्ञान में सबसे शक्तिशाली उपकरणों में से एक बना हुआ है।
पोस्ट करने का समय: फरवरी-22-2023